Deubiquitinating Enzyme (DUBs) Activity Assay Kits

amsbio:BAP1 抑制劑篩選檢測試劑盒

BAP1 Inhibitor Screening Assay Kit

貨號：AMS.BKDU012-096

有效測量酶活性

泛素途徑對于標(biāo)記蛋白體降解的蛋白質(zhì)至關(guān)重要。此外，泛素化還控制著多種蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性、功能和細(xì)胞內(nèi)定位。研究人員正在積極鑒定泛素激活（E1）、偶聯(lián)（E2）和連接（E3）酶復(fù)雜級聯(lián)的新成分，并研究泛素調(diào)節(jié)的途徑，如凋亡、DNA修復(fù)、組蛋白的表觀遺傳修飾和胚胎發(fā)育。AMSBIO為研究這些調(diào)控途徑提供了許多酶和檢測試劑盒。

優(yōu)勢

利用熒光底物進(jìn)行檢測

快速篩查DUB抑制劑

敏感和具體

用于動力學(xué)或終點(diǎn)分析

使用激發(fā)波長為485nm、發(fā)射波長為535nm的微孔板讀數(shù)器很容易檢測到

檢測原理

泛素化和去泛素化是泛素-蛋白酶體系統(tǒng)中的兩個重要生理過程，負(fù)責(zé)細(xì)胞中的蛋白質(zhì)降解。去泛素化酶（DUB）家族包含約100種蛋白質(zhì)，可以從各種底物中去除泛素。去泛素化酶（DUBs）廣泛參與各種細(xì)胞過程的調(diào)節(jié)，如細(xì)胞增殖、自噬、DNA損傷修復(fù)和免疫反應(yīng)。它們在惡性腫瘤、神經(jīng)退行性疾病和其他免疫相關(guān)疾病的發(fā)展中起著重要作用。此外，一些細(xì)菌和病毒，如嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒，也表達(dá)致病性DUBs以抑制宿主免疫反應(yīng)，增加其存活和復(fù)制的機(jī)會。因此，DUBs代表了靶向藥物開發(fā)的新候選者。

與各種熒光團(tuán)結(jié)合的泛素衍生物已被報(bào)道為生化DUB測定的底物。泛素羅丹明110（Ub-Rho110）是一種基于熒光羅丹明的底物。Ub-Rho110是一種泛素底物，其C末端衍生物是Rho110。當(dāng)羅丹明位于Ub-Rho110部分時，它被二取代，從而淬滅了固有熒光。然而，DUBs會釋放出表現(xiàn)出強(qiáng)烈熒光的單取代羅丹明，從而可以通過使用485nm激發(fā)后監(jiān)測535nm的發(fā)射波長來實(shí)時監(jiān)測DUBs的靈敏度或活性。有了這些較長的波長，自體熒光中偽影的風(fēng)險(xiǎn)就降低了。熒光的增加與DUB活性成正比。

Human BAP1 [N2-Q729 (end) amino acids of UniProt number Q92560] was co-expressed as N-terminal His-fusion protein (86 kDa) using baculovirus expression system.方便：非放射性，定量：低背景信號，適用于高通量分析，試劑盒組分：1 瓶反應(yīng)緩沖液 （10×），1 瓶 Ub-Rho110 （100×），1 瓶 DUB 蛋白，1 瓶 50 mg DTT，1 × 96 孔黑色微升板

上海牧榮生物科技有限公司

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