anogen：多重人細(xì)胞因子ELISA試劑盒(Th1/Th2/Th17) 貨號：EM10003

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多重人類細(xì)胞因子ELISA試劑盒(Th1/Th2/Th17細(xì)胞因子)，96孔

用于同時(shí)定量測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物樣品中的T輔助細(xì)胞分化細(xì)胞因子，包括干擾素-γ、白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-10、白細(xì)胞介素-13、白細(xì)胞介素-17、白細(xì)胞介素-22和腫瘤壞死因子-α

這種用于Th1/Th2/Th17細(xì)胞因子的多重ELISA試劑盒被設(shè)計(jì)用于半定量和同時(shí)測定與T輔助細(xì)胞分化相關(guān)的細(xì)胞因子。該試劑盒同時(shí)測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物樣品中的干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、白細(xì)胞介素-13(IL-13)、白細(xì)胞介素-17A(IL-17A)、白細(xì)胞介素-22(IL-22)和腫瘤壞死因子-α (TNF-α)。Th1/Th2/Th17細(xì)胞因子多重ELISA試劑盒與其他抗原定量細(xì)胞因子ELISA試劑盒結(jié)合，有望用于研究各種疾病模型中細(xì)胞因子表達(dá)、T輔助細(xì)胞分化之間的關(guān)系。   該試劑盒僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用，不應(yīng)用于任何診斷或治療程序。 

介紹 

T輔助細(xì)胞(Th細(xì)胞)是一組多樣化的CD4+ T細(xì)胞，通過細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞間接觸(表面分子表達(dá))在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。Th細(xì)胞的重要性表現(xiàn)在HIV患者的獲得性免疫缺陷，其CD4+ T細(xì)胞被HIV病毒選擇性感染和破壞。Th細(xì)胞的功能是多方面的，包括刺激CD8+細(xì)胞毒性細(xì)胞，促進(jìn)B細(xì)胞增殖，調(diào)節(jié)抗體亞類轉(zhuǎn)換，激活巨噬細(xì)胞和先天免疫系統(tǒng)中的其他細(xì)胞。 

T輔助細(xì)胞來源于幼稚CD4+ T細(xì)胞，其在骨髓中產(chǎn)生，并在與T細(xì)胞受體上的互補(bǔ)決定區(qū)相匹配的同源抗原接觸時(shí)，在外周淋巴器官和血液中分化為效應(yīng)Th細(xì)胞。在20世紀(jì)80年代中期，Th細(xì)胞根據(jù)其細(xì)胞因子分泌模式及其在細(xì)胞免疫和體液免疫中的作用被分為輔助性T細(xì)胞1(Th1)和輔助性T細(xì)胞2(Th2)。Th1細(xì)胞分泌IFN-γ作為其標(biāo)志性細(xì)胞因子，也是IL-2的主要產(chǎn)生者。Th2細(xì)胞不能產(chǎn)生IFN-γ，但產(chǎn)生IL-4、IL-5和IL-13作為其標(biāo)志性細(xì)胞因子。Th1細(xì)胞是宿主防御細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌和病毒所必需的，而Th2細(xì)胞是針對細(xì)胞外寄生蟲的體液反應(yīng)所必需的。細(xì)胞因子在T輔助細(xì)胞譜系的發(fā)育和維持中起重要作用。在IL-12存在的情況下，幼稚的CD4+細(xì)胞傾向于分化為Th1，而IL-4刺激Th2的發(fā)展。有趣的是，一個(gè)Th亞群產(chǎn)生的細(xì)胞因子傾向于抑制其他Th亞群的發(fā)展。例如，Th2分泌的IL-10可以通過抑制Th1和刺激Th2分化來抵消IL-12的作用。 

在2005年，Harrington等人描述了分泌IL-17的CD4+ T細(xì)胞的新亞群作為輔助性T細(xì)胞17 (Th17 ),其參與自身免疫和清除細(xì)胞外細(xì)菌和真菌。據(jù)觀察，在缺乏IFN-r和IL-4的情況下，IL-23可以從幼稚的CD4+ T細(xì)胞誘導(dǎo)Th17細(xì)胞。最近，提出了T濾泡輔助細(xì)胞(Tfh)、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、T輔助細(xì)胞9(Th9)和T輔助細(xì)胞22(Th12)。 

IL-2是驅(qū)動適應(yīng)性免疫的關(guān)鍵細(xì)胞因子之一。在T細(xì)胞受體通過與抗原呈遞細(xì)胞在MHC上呈遞的抗原結(jié)合而被激活后，由幼稚CD4+細(xì)胞立即分泌。IL-2刺激Th1分化、克隆擴(kuò)增并作為自分泌刺激其自身產(chǎn)生。它還促進(jìn)抗原特異性記憶T細(xì)胞的存活，并刺激調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的成熟。細(xì)胞因子也影響B(tài)細(xì)胞、CD8+ T細(xì)胞、γδT細(xì)胞、NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的活性。

 IL-10由多種細(xì)胞類型表達(dá)，并在炎癥和免疫反應(yīng)中起重要作用。它下調(diào)Th1細(xì)胞因子的表達(dá)。IL-10還抑制單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子，下調(diào)單核細(xì)胞和樹突細(xì)胞上活化和共刺激分子的表達(dá)，并刺激B細(xì)胞和肥大細(xì)胞的生長。

由Th1，CD8產(chǎn)生+T細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞，已知IFN-g刺激幼稚CD4+ T細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞。它既是病毒復(fù)制的抑制劑，也是許多免疫功能的調(diào)節(jié)劑。據(jù)報(bào)道，IFN-g誘導(dǎo)其自身的表達(dá)。IFN-g具有抗病毒、抗原蟲和免疫調(diào)節(jié)活性。IFN-g的免疫調(diào)節(jié)作用是廣泛而多樣的。在單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞中，IFN-g增加1類MHC抗原的表達(dá)；增加IL-1、血小板活化因子、H2O2和蝶呤，保護(hù)單核細(xì)胞免受LAK細(xì)胞介導(dǎo)的裂解；并下調(diào)IL-8 mRNA的表達(dá)。IFN-g選擇性增強(qiáng)IgG2aLPS刺激的B細(xì)胞活化分泌。 IFN-g已被證明能上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞上ICAM-1的表達(dá)，但不能上調(diào)E-選擇素或VCAM-1的表達(dá)。據(jù)報(bào)道，IFN-g還與胚胎間隔神經(jīng)元膽堿能表型的形成有關(guān)。

 IL-4最初被定性為B細(xì)胞刺激因子(BSF-1 ),因?yàn)樗赥h2細(xì)胞分化、B細(xì)胞擴(kuò)增和分化為漿細(xì)胞中起關(guān)鍵作用。后來發(fā)現(xiàn)IL-4是一種多效性細(xì)胞因子，對不同類型的細(xì)胞具有多種免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)功能。IL-4誘導(dǎo)抗體類別轉(zhuǎn)換為IgE，上調(diào)II類產(chǎn)生，并在氣道過敏中起作用。IL-4刺激針對寄生蟲的保護(hù)性免疫。還報(bào)道了IL-4與轉(zhuǎn)移有關(guān)。IL- 4是由幼稚的CD4產(chǎn)生的+t細(xì)胞，Th2細(xì)胞，胎兒胸腺細(xì)胞，CD8+t細(xì)胞、肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。IL- 4與IL-13具有大約25%的氨基酸序列同源性，IL-13與IL-4具有許多相同的生物學(xué)功能。由四個(gè)外顯子和三個(gè)內(nèi)含子組成的人IL-4基因已經(jīng)被定位在一條染色體上，該染色體含有串聯(lián)排列的IL-3、IL-5、IL-9、IL-13和GM-CSF基因。 

IL-13主要由活化的輔助性T細(xì)胞分泌。除了IL-13Rα1和IL-13Rα2之外，IL-13還與IL-4Rα結(jié)合。IL-13的功能與IL-4部分重疊。IL-4和IL-13都通過受體激活與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6 (STAT6)連接。IL-13可以誘導(dǎo)B細(xì)胞增殖和IgE分類轉(zhuǎn)換。然而，與IL-4相比，IL-13在這方面的能力較弱。與IL-4不同，IL-13在造血細(xì)胞轉(zhuǎn)移中不發(fā)揮重要作用，如T輔助細(xì)胞向T輔助細(xì)胞2的分化。IL-13還與過敏性氣道疾病的許多特征相關(guān)，包括粘液分泌過多、杯狀化生、趨化因子誘導(dǎo)和效應(yīng)細(xì)胞募集。所有這些都會導(dǎo)致氣道阻塞。已發(fā)現(xiàn)IL-13基因多態(tài)性與嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、血清總IgE和哮喘高風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。據(jù)報(bào)道，IL-I3信號傳導(dǎo)在誘導(dǎo)寄生器官中非免疫細(xì)胞的生理變化中是重要的。

 IL-17A是新發(fā)現(xiàn)的促炎細(xì)胞因子家族的原型，該家族由IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E (IL-25)和IL-17F組成。所有的IL-17都具有相似的結(jié)構(gòu)，具有四個(gè)高度保守的半胱氨酸殘基和相同的三維結(jié)構(gòu)，這使該家族區(qū)別于其他細(xì)胞因子。IL-17由一組稱為Th17細(xì)胞的CD4+ T輔助細(xì)胞產(chǎn)生。除了先前發(fā)現(xiàn)的Th1和Th2細(xì)胞，Th17細(xì)胞存在于第三組輔助性T細(xì)胞中。IL-23，一種生長和穩(wěn)定因子，是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)參與Th 17細(xì)胞發(fā)育的細(xì)胞因子。后來，其他細(xì)胞因子，包括TGF-β，白細(xì)胞介素-6和白細(xì)胞介素-21，也被發(fā)現(xiàn)有助于這一過程。該過程中涉及的轉(zhuǎn)錄因子被鑒定為STAT3、RORgt和RORa。像IFN-g一樣，IL-17是延遲型反應(yīng)的有效介質(zhì)。IL-17誘導(dǎo)許多其他促炎細(xì)胞因子和趨化因子的分泌，如IL-6、IL-8、GM-CSF、G-CSF、TGF-β、TNF-α、GRO-α、MCP-1，并刺激NF-kappaB、絲裂原活化蛋白激酶和許多細(xì)胞類型的前列腺素的表達(dá)。通過刺激細(xì)胞因子的產(chǎn)生和募集單核細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞到炎癥部位，細(xì)胞因子在對組織損傷和侵襲的反應(yīng)中發(fā)揮其作用。 IL-22由樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞在細(xì)菌感染、自身免疫和組織炎癥過程中產(chǎn)生。

IL-22通過其專門在先天免疫細(xì)胞上表達(dá)的受體作用于這些細(xì)胞。在CD4+ T輔助細(xì)胞中，已發(fā)現(xiàn)IL-22表達(dá)與Th17和Th1相關(guān)。最近，通過共表達(dá)趨化因子受體CCR6和皮膚歸巢受體CCR4和CCR10，表征了表達(dá)IL-22的T輔助細(xì)胞亞群(Th22 ),其與其他T細(xì)胞不同。銀屑病皮膚炎癥、特應(yīng)性皮炎和炎癥性腸病中IL-22表達(dá)升高。在皮膚T細(xì)胞淋巴瘤中，IL-22主導(dǎo)腫瘤微環(huán)境，并且觀察到STAT3磷酸化。還發(fā)現(xiàn)IL-22在小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型中促進(jìn)小鼠肝細(xì)胞存活并改善腸道炎癥。發(fā)現(xiàn)IL-22的天然拮抗劑IL-22結(jié)合蛋白下調(diào)IL-22的功能。 

腫瘤壞死因子α(TNF-α)，也稱為惡病質(zhì)素，最初因其引起小鼠腫瘤出血性壞死的顯著能力而命名。TNF-α的主要來源被認(rèn)為是單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，但已知各種細(xì)胞類型表達(dá)這種細(xì)胞因子。TNF-α在細(xì)胞因子如IL-1、1L-2、GM-CSF、TNF-α本身和細(xì)菌脂多糖的刺激下產(chǎn)生。Th1細(xì)胞分泌IFN-g、IL-2、IL-10和TNF-α/β。各種病理狀況與TNF-a的高水平產(chǎn)生有關(guān)，包括膿毒性休克綜合征、惡病質(zhì)、自身免疫性疾病、肝炎、白血病、心肌缺血、多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和腦膜炎球菌敗血癥。TNF-a是一種多效性細(xì)胞因子，可通過TNF-a毒性(組織損傷、分解代謝疾病和介導(dǎo)膿毒性休克)誘發(fā)疾病，并改善宿主防御機(jī)制(刺激炎癥和增加免疫細(xì)胞功能)。由于TNF-α在免疫反應(yīng)中具有如此復(fù)雜和重要的功能，研究TNF-α有助于理解其在T細(xì)胞分化中的作用。

 這種ELISA測定是一種3.5小時(shí)的固相免疫測定，可容易地應(yīng)用于測量細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物液體中與T輔助細(xì)胞分化相關(guān)的八種細(xì)胞因子的水平。它與其他蛋白質(zhì)無交叉反應(yīng)。

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