HOOK 6X His蛋白旋轉(zhuǎn)純化試劑盒可快速純化細(xì)菌培養(yǎng)物中的可溶性6X His標(biāo)簽蛋白。

細(xì)菌首先被溶解細(xì)菌PE LB和PE LB溶菌酶以釋放全部可溶性蛋白質(zhì)，同時(shí)保持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和活性。通過(guò)向澄清的溶胞產(chǎn)物中加入0.5毫升固定化金屬親和樹(shù)脂，用固定化金屬親和層析（IMAC）純化6X His標(biāo)簽蛋白。將樹(shù)脂轉(zhuǎn)移到方便的旋轉(zhuǎn)柱中，在此快速洗滌，并用咪唑緩沖液洗脫6X His蛋白。

Bacterial- PELB試劑盒用于從細(xì)菌細(xì)胞中提取可溶性蛋白質(zhì)。這是基于溶菌酶裂解的專(zhuān)有改進(jìn)，允許提取可溶性蛋白質(zhì)并同時(shí)去除細(xì)胞裂解過(guò)程中釋放的核酸（DNA和RNA）。細(xì)菌-PE LB裂解消除了粘度積累，可通過(guò)較低的離心力實(shí)現(xiàn)有效的澄清。不需要超聲處理。

HOOK 6X His蛋白旋轉(zhuǎn)純化試劑盒可與以下任一產(chǎn)品一起提供鎳螯合樹(shù)脂或鈷固定化金屬親和色譜用螯合樹(shù)脂。與鎳螯合樹(shù)脂相比，鈷螯合樹(shù)脂對(duì)6X His標(biāo)簽具有較低的結(jié)合親和力，這導(dǎo)致非特異性結(jié)合較少，并且可能導(dǎo)致產(chǎn)量略低。

HOOK 6X His蛋白旋轉(zhuǎn)純化試劑盒經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可產(chǎn)生約1毫克/50毫升的可溶性His標(biāo)簽蛋白培養(yǎng)物，純度為80-90%，具體取決于蛋白的表達(dá)水平、樹(shù)脂類(lèi)型、構(gòu)象和溶解性。

對(duì)于更大規(guī)模的細(xì)菌蛋白質(zhì)分離，我們推薦我們的重力流約250毫升細(xì)菌中超過(guò)10毫克蛋白質(zhì)的試劑盒。

特征

• 從大約50毫升細(xì)菌培養(yǎng)物中分離出超過(guò)1毫克的His標(biāo)簽蛋白
• 無(wú)需超聲處理，配有裂解緩沖液和酶
• 可用鎳或鈷樹(shù)脂
• 旋轉(zhuǎn)列格式

應(yīng)用程序

• 用于從細(xì)菌中分離6X His標(biāo)簽重組蛋白的旋轉(zhuǎn)柱形式