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簡要描述：維生素E測試盒 維生素E（Vitamin E，VE）試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。
產(chǎn)品型號：廠商性質(zhì)：代理商更新時間：2024-05-08訪 問 量：690詳細(xì)介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
維生素E測試盒
微量法100T/48S
測定意義
維生素E（Vitamin E）是一種脂溶性維生素，其水解產(chǎn)物為生育酚，是生物體中最主要的抗氧化劑之一，能阻止不飽和脂肪酸收到過氧化作用的損傷，維持不飽和脂肪酸細(xì)胞膜的完整性和正常功能，具有延緩衰老、預(yù)防溶血性貧血作用，在醫(yī)藥、化妝品、保健品、食品行業(yè)具有較高的應(yīng)用價值。
測定原理
VE還原Fe3+為Fe2+，F(xiàn)e2+與1,10-菲羅啉產(chǎn)生有色絡(luò)合物，在530nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、漩渦震蕩儀。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體2mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體2mL×1支，4℃保存。
試劑三：液體2mL×1支，4℃保存。
試劑四：液體6mL×1瓶，4℃保存。
樣本處理
組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，勻漿后用提取液定至1mL，定至在漩渦混勻儀上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測定。
細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）后在漩渦混勻儀上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測定。
血清：取0.1mL，加0.9mL提取液，漩渦儀混勻上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測定。
測定操作
對照管 | 測定管 | |
樣品（μL） | 100 | 100 |
試劑一（μL） | 20 | 20 |
試劑二（μL） | 20 | |
試劑三（μL） | 20 | |
充分混勻，25℃反應(yīng)5min | ||
試劑四（μL） | 60 | 60 |
充分混勻，于微量石英比色皿/96孔板，無水乙醇調(diào)零，測定530nm處吸光值，記為A對照管和A測定管，△A=A測定管-A對照管。 | ||
計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.22x + 0.0065 R2 = 0.9978
1. 按照蛋白含量計算
VE含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷（V樣×Cpr）
= 9.09×（△A -0.0065）÷ Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計算
VE含量（μg/g）= （△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷（V樣×W÷V樣總）
= 9.09×（△A -0.0065）÷ W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算
VE含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）
= 9.09×（△A -0.0065）÷ 細(xì)胞數(shù)量
4. 按照液體體積計算
VE含量（μg/mL）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反總÷V樣×10
= 90.9×（△A -0.0065）
V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：加入樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g
用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.11x + 0.0065 R2 = 0.9978
1. 按照蛋白含量計算
VE含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.11×V反總÷（V樣×Cpr）
= 18.18×（△A -0.0065）÷ Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計算
VE含量（μg/g）= （△A -0.0065）÷0.11×V反總÷（V樣×W÷V樣總）
= 18.18×（△A -0.0065）÷ W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算
VE含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.11×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）
= 18.18×（△A -0.0065）÷ 細(xì)胞數(shù)量
4. 按照液體體積計算
VE含量（μg/mL）=（△A -0.0065）÷0.11×V反總÷V樣×10
= 181.8×（△A -0.0065）
V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：加入樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g
注意事項
若反應(yīng)體系產(chǎn)生沉淀，需要將樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?，并在計算公式中乘以稀釋倍?shù)。
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