VEPHOTON 疫熒光轉(zhuǎn)移標(biāo)記試劑盒——NF-KAPPA B (NF-KB) - P65 (RELA) IMMUNOFLUORESCENCE LABELING KIT (NF-KAPPAB, NFKB-3)

VEPHOTON 疫熒光轉(zhuǎn)移標(biāo)記試劑盒

• 提供NF-KPAPAB激活和P65轉(zhuǎn)位的視覺演示。

• 提供匹配的主要設(shè)備和2 ^O 熒光標(biāo)記抗體,在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測(cè)p65。

• 適用於大部分哺乳動(dòng)物細(xì)胞(例如:人類,老鼠,老鼠,倉(cāng)鼠,狗,兔子,馬。

• 通過用像素定量軟件測(cè)量P65的免疫熒光強(qiáng)度,對(duì)NF-KB激活進(jìn)行量化。*

• 在40個(gè)顯微鏡幻燈片上給p65貼上標(biāo)簽的充分解決方案。

背景

nf-kb復(fù)合體位于胞質(zhì)中,處于非活性狀態(tài),由與P65-p50異二聚體組合的抑制性Ikb亞基組成。在刺激作用下,IKB抑制子單元被超基化和降解,暴露在P65(RELA)子單元上的核定位信號(hào),然后轉(zhuǎn)移到原子核中。該試劑盒提供的抗體用于標(biāo)記細(xì)胞核和胞質(zhì)中的p65。然后利用熒光顯微鏡和像素量化軟件來(lái)估計(jì)P65的發(fā)射強(qiáng)度。

細(xì)胞生長(zhǎng)在玻璃蓋上,約85%的共通性,并處理激活NF-KPAPAB。細(xì)胞蛋白首先是交聯(lián)的,并固定與甲醛(未提供)。交聯(lián)反應(yīng)用提供的淬火溶液進(jìn)行淬火。血漿和核膜是滲透性提供的溶液,其中包括滲透試劑和蛋白阻滯劑。  一個(gè)包括的P65IGG抗體,然后應(yīng)用于細(xì)胞1小時(shí)。未綁定抗體被洗去,并提供羅丹明標(biāo)記的FAB片段二級(jí)抗體應(yīng)用1小時(shí)。未綁定的二次抗體被沖走,一個(gè)由滑塊和蓋片組成的三明治,中間有抗褪色溶液。安蒂法去溶液可以在一夜之間凝固。顯微鏡滑蓋滑塊配置現(xiàn)已準(zhǔn)備好用于視覺和定量檢測(cè)P65易位。