Vero細(xì)胞系是一種源自非洲綠猴腎上皮細(xì)胞的永生化哺乳動物細(xì)胞模型，站在病毒學(xué)、微生物學(xué)以及細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的前沿。它們的廣泛應(yīng)用涵蓋疫苗開發(fā)、藥物篩選以及病毒和寄生蟲生物學(xué)、腫瘤免疫學(xué)和免疫治療策略的探索。

Vero細(xì)胞系的建立可以追溯到1962年，起源于非洲綠猴的腎上皮細(xì)胞。

Vero細(xì)胞克隆及其性質(zhì)

來自Vero細(xì)胞系的不同克隆顯示出區(qū)別于原始細(xì)胞系的特征。其中，兩個(gè)著名的Vero細(xì)胞克隆是:

• Vero E6細(xì)胞系:該克隆也稱為Vero C1008，來自Vero 76細(xì)胞，1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀釋技術(shù)分離。Vero E6細(xì)胞特別適合培養(yǎng)復(fù)制緩慢的病毒。

• Vero 76細(xì)胞:這些細(xì)胞起源于1968年的一只非洲綠猴的腎臟，保持了Vero細(xì)胞的上皮形態(tài)特征。

這些Vero細(xì)胞變體與親代細(xì)胞系一起，繼續(xù)有助于推進(jìn)病毒學(xué)研究和醫(yī)學(xué)干預(yù)措施的發(fā)展，標(biāo)志著它們在科學(xué)界的重要性。

培養(yǎng)猴細(xì)胞系Vero細(xì)胞需要熟悉特定的參數(shù)，如倍增時(shí)間、接種密度和合適的生長培養(yǎng)基。

• 人口倍增時(shí)間:Vero細(xì)胞的倍增時(shí)間約為24小時(shí)。

• 堅(jiān)持性:Vero細(xì)胞粘附在表面上，培養(yǎng)時(shí)通常形成單層。

• 播種密度:建議從1倍10^4 cells/cm^2.的播種密度開始為了培養(yǎng)粘附的Vero細(xì)胞，用PBS清洗它們并用Accutase處理它們以分離它們。分離后，離心細(xì)胞，將其重新懸浮在新鮮培養(yǎng)基中，并將其轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。

• 生長培養(yǎng)基:哈姆的F12和DMEM都是培養(yǎng)Vero細(xì)胞的合適培養(yǎng)基。這些應(yīng)補(bǔ)充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清（FBS）以支持最佳生長。培養(yǎng)基應(yīng)該每周更新兩到三次。

• 生長條件:Vero細(xì)胞在37°C的溫度和5% CO2的潮濕環(huán)境中生長旺盛。

• 存儲:對于長期儲存，Vero電池應(yīng)保持在低于-150°C的溫度下，要么放在超低溫冰箱中，要么放在液氮的蒸汽相中。

• 冷凍過程和介質(zhì):對于冷凍保存，使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生長培養(yǎng)基作為冷凍培養(yǎng)基。采用緩慢冷凍技術(shù)，每分鐘逐漸降低1°C的溫度。

• 解凍過程:將容器浸入37°C水浴中并輕輕攪動40-60秒，解凍Vero細(xì)胞。然后，在新鮮培養(yǎng)基中稀釋細(xì)胞，離心去除冷凍保護(hù)劑，重新懸浮在新鮮生長培養(yǎng)基中，并將其置于新的燒瓶中以恢復(fù)和生長。

• 生物安全等級:Vero細(xì)胞應(yīng)在符合1級生物安全要求的實(shí)驗(yàn)室中處理。

Vero細(xì)胞系在研究中的應(yīng)用

Vero細(xì)胞系在細(xì)胞生物學(xué)和病毒學(xué)領(lǐng)域有許多研究應(yīng)用。在這里，我們討論了一些具體的問題。

病毒研究和疫苗生產(chǎn)中的Vero細(xì)胞

源自非洲綠猴腎細(xì)胞的Vero細(xì)胞已成為多種病毒疫苗生物過程開發(fā)中的主要成分，包括脊髓灰質(zhì)炎病毒和日本腦炎病毒。它們在貼壁和懸浮培養(yǎng)中的適應(yīng)性及其廣泛的病毒支持能力，包括對小反芻獸疫病毒等病原體的支持能力，突出了它們在病毒分離和疫苗開發(fā)中的重要性。

許多研究利用Vero細(xì)胞生產(chǎn)人類疫苗。例如，2019年發(fā)表的一項(xiàng)引人注目的研究證明了在黃熱病病毒滅活疫苗的開發(fā)中使用Vero細(xì)胞【2】。

Vero細(xì)胞通常用于病毒感染研究。

Vero細(xì)胞在組織工程和上游生物過程開發(fā)中的作用

除了疫苗生產(chǎn)，Vero細(xì)胞還有助于組織工程和更廣泛的生物過程開發(fā)領(lǐng)域，這強(qiáng)調(diào)了對其特性和應(yīng)用進(jìn)行持續(xù)研究的必要性。選擇合適的Vero細(xì)胞亞系是最大限度地發(fā)揮其在生物技術(shù)和制藥工業(yè)中的潛力的關(guān)鍵。

Vero細(xì)胞在藥物療效和安全性測試中的應(yīng)用

Vero細(xì)胞經(jīng)常用于藥物測試，以評估藥物化合物的有效性和安全性。在研究各種藥物和治療劑的細(xì)胞毒性作用時(shí)，這些細(xì)胞通常被認(rèn)為是正常腎細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)模型。例如，研究比較了白骨壤植物根提取物對肝癌細(xì)胞系HepG2和猴腎上皮細(xì)胞Vero細(xì)胞的影響，發(fā)現(xiàn)提取物對癌細(xì)胞的損害比對正常細(xì)胞的損害更大。

Vero細(xì)胞的局限性

盡管vero細(xì)胞被廣泛使用，但它們也有其局限性，例如Vero毒素的產(chǎn)生和基因組的改變可能會影響某些應(yīng)用。了解Vero細(xì)胞（包括Vero譜系F6）的特定亞系和基因組特征對于優(yōu)化其在各種生物過程中的應(yīng)用至關(guān)重要。