Neuvitro公司提供專業(yè)涂層，覆蓋廣泛的基材，如PDL、PLL、PLO、膠原蛋白、明膠、層粘連蛋白、纖連蛋白、PDL+層粘連蛋白、PDL+纖連蛋白、PLO+層粘連蛋白、PLO+纖連蛋白、PDL +層粘連蛋白+纖連蛋白等。Electron Microscopy Science、ThermoFisher Scientific 和 VWR 提供的大多數(shù)帶涂層德國蓋玻片實(shí)際上是由 Neuvitro Corporation 制造的。

纖連蛋白是細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) 的糖蛋白之一，可與跨膜受體和其他細(xì)胞外基質(zhì)成分（如膠原蛋白、纖維蛋白、多聚糖等）結(jié)合。纖連蛋白在細(xì)胞粘附、生長、遷移和分化中發(fā)揮重要作用。它對于其他過程也很重要，例如傷口愈合和胚胎發(fā)育。

Sigma 的纖連蛋白涂層方案

必須針對每種細(xì)胞系和應(yīng)用確定最佳貼壁條件。

1. 用 0.5 mL 無菌水重新配制。不要攪動(dòng)。讓溶液靜置 30 分鐘以溶解?？赡軙?huì)殘留少量未溶解的物質(zhì)。這不會(huì)影響產(chǎn)品性能。

2. 在無菌平衡鹽溶液中稀釋纖連蛋白，并以最小體積包被培養(yǎng)物表面。

3. 在室溫下風(fēng)干至少 45 分鐘。多余的纖連蛋白可以通過抽吸去除，但這不是必需的。

ABIF 的纖連蛋白涂層方案

1. 庫存纖連蛋白（Sigma F-0895，來自人血漿的 1 mg/ml 纖連蛋白）應(yīng)分裝冷凍（-80oC），可在大約一個(gè)月內(nèi)使用。在冰箱中大約一個(gè)月后，蛋白質(zhì)會(huì)降解，細(xì)胞不再能很好地?cái)U(kuò)散。

2. 對于 MEF 或 3T3 細(xì)胞，用 PBS++ 將 1mg/ml 纖連蛋白原液稀釋至 1 µg/ml；對于 CHO 細(xì)胞，稀釋至 2 µg/ml。 （1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS）

3. 將 1 ml 纖連蛋白溶液放在玻璃底皿的蓋玻片上，并在冰箱中放置過夜。

4. 用 PBS（含或不含鈣和鎂）沖洗 3 次，并置于冰箱中，兩周內(nèi)使用

Jacobs 的纖連蛋白涂層方案

程序

第 1 天（約 1 小時(shí)，等待 1 小時(shí)）

1. 載玻片準(zhǔn)備

2. 將載玻片浸泡在 100% EtOH 中至少五分鐘（通常 20 分鐘是比較好的流動(dòng)時(shí)間）。

3. 在引擎蓋中打開 20 個(gè)培養(yǎng)皿。

4. 將載玻片和乙醇放入通風(fēng)柜中。

5. 用同樣的 100% 乙醇對平頭鉗進(jìn)行消毒。

6. 將載玻片傾斜在培養(yǎng)皿邊緣晾干（面朝上）

7. 將載玻片全部放下后翻轉(zhuǎn)，以便另一面可以干燥，并且蓋子上聚集的任何乙醇都可以干燥。

8. 一旦所有乙醇蒸發(fā)（載玻片上不應(yīng)有潮濕發(fā)亮的地方），將載玻片平放在培養(yǎng)皿底部。

9. 將蓋子蓋在盤子上。

纖連蛋白溶液

1. 每 1 mL PBS 溶液 (1:100) 制備 10 ul 纖連蛋白。每張載玻片需要 1 mL 的溶液。

• 纖連蛋白溶液的體積 = [載玻片數(shù)量] x 1 ml/載玻片

2. 4°C 下可保存長達(dá) 6 個(gè)月

3. 對于 20 張載玻片，這意味著將 200 ul 纖連蛋白加入到 19.8 ml PBS 中。

4. 攪拌均勻。

涂層

1. 小心地將 1 ml 纖連蛋白溶液移至每個(gè)載玻片頂部。這是一個(gè)微妙的過程，要小心，慢慢來

2. 不要讓溶液掉落到載玻片的邊緣。如果發(fā)生這種情況，您需要收集液體，對載玻片進(jìn)行消毒，干燥并重試。任何從側(cè)面落下的液體都會(huì)將剩余的液體吸出并吸到載玻片下方，這是我們不希望的。

3. 確保溶液覆蓋整個(gè)幻燈片。您可以使用無菌移液器吸頭將液體涂抹到任何裸露的點(diǎn)上。表面張力將使液體留在載玻片上，但不要將其推到側(cè)面。

4. 蓋上玻片并讓玻片在細(xì)胞培養(yǎng)罩中于室溫下不受干擾地靜置 1 小時(shí)。

5. 平板細(xì)胞

GG-12-fibronectin：直徑12毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $88.65

GG-12-1.5-fibronectin：直徑12毫米，#1.5厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $98.65

GG-14-fibronectin：直徑14毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $93.65

GG-15-fibronectin：直徑15毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $98.65

GG-18-fibronectin：直徑18毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $113.65

GG-18-1.5-fibronectin：直徑18毫米，#1.5厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $123.65

GG-20-fibronectin：直徑20毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $120.65

GG-22-fibronectin：直徑22毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $124.65

GG-22-1.5-fibronectin：直徑22毫米，#1.5厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $134.65

GG-24-fibronectin：直徑24毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $134.65

GG-25-fibronectin：直徑25毫米，#1厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $144.65

GG-25-1.5-fibronectin：直徑25毫米，#1.5厚度，60片CE認(rèn)證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細(xì)胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可供使用 $174.65