celltechgen:免疫測定試劑和試劑盒——用于流式細胞術(shù)的大鼠 CLCN6 珠基檢測套裝

貨號：CTG-BAR1133

試劑盒成分

2 ml 針對大鼠 CLCN6 的單克隆抗體，R-PE 綴合。

2 ml 抗 R-PE 磁珠。

1 ml 微珠釋放試劑和 1 ml 終止緩沖液

10 毫升稀釋緩沖液。

該試劑盒旨在使用磁珠磁性標記來分離和檢測大鼠 CLCN6 ⁺細胞。首先，用與R-PE和抗R-PE磁珠綴合的大鼠CLCN6單克隆抗體標記細胞，在磁力柱上陽性選擇大鼠CLCN6 ⁺細胞，收集用于進一步流式細胞術(shù)分析。磁珠釋放試劑和終止緩沖液可用于將帶有抗體-R-PE 的細胞從磁珠中釋放出來。

目標特征

符號：大鼠 CLCN6

基因ID：295586

Uniprot 條目：D4A3H5

蛋白質(zhì)名稱： 氯轉(zhuǎn)運蛋白 6       

生物體：褐家鼠（大鼠）

容量        

1 X 10 ⁹單元

公式  

所有組分均以含有穩(wěn)定劑和 0.05% 疊氮hua鈉的緩沖液形式提供。

儲存與使用      

避光保存在 2?8 ^o C 下。不要冷凍。有效期標注在小瓶標簽上。該產(chǎn)品僅供研究，不可用于診斷程序。

通用協(xié)議

檢測試劑盒用于分離和檢測具有特定抗原的靶細胞。篩選過程是用針對特定抗原的單克隆抗體直接對細胞進行磁性標記，并與 R-PE 和 Anti-R-PE 磁珠綴合，然后將標記的細胞保留在磁柱上，然后將目標細胞篩選出來。被釋放并收集以進行進一步的流式細胞術(shù)分析。

1. 樣品制備

• 當使用抗凝外周血或血沉棕黃層時，應(yīng)通過密度梯度離心分離外周血單核細胞 (PBMC)。

• ^{要在密度梯度分離后去除血小板，請將細胞沉淀重懸于緩沖液中，并在 20 o} C下以 200 x g 離心 10?15 分鐘。小心吸出上清液。重復(fù)洗滌步驟。

• 當處理組織或溶解的血液時，使用標準方法制備單細胞懸浮液。

• 死細胞可能會非特異性地與磁珠結(jié)合。要去除死細胞，我們建議使用密度梯度離心或死細胞去除試劑盒。

• 保持細胞低溫，并使用預(yù)冷的溶液。

2. 磁性標簽

• 下面給出的磁性標記體積最多適用于 10 ⁷個細胞。當使用少于 10 ^{7 個}細胞時，請使用所示的相同體積。當使用更高的細胞數(shù)量時，請相應(yīng)地擴大所有試劑體積和總體積。

• 應(yīng)滴定一抗染料偶聯(lián)抗體以確定最佳染色稀釋度。染色不應(yīng)增加陰性群體的熒光強度。

1)    計算細胞數(shù)量。

2)     300×g離心細胞懸液10分鐘。全吸出上清液。

3)每 10    ^{7 個}總細胞 在 80 µL 緩沖液中重懸細胞沉淀。

4)    加入 20 µl PE 偶聯(lián)一抗，充分混勻，并在 2?8 ^o C下避光孵育 10 分鐘。

5)每 10    ^{7 個}細胞 添加 1?2 mL 緩沖液，洗滌細胞以去除未結(jié)合的一抗，并在 300×g 下離心 10 分鐘。

6)全吸出上清液，并在每 10    ^{7 個}總細胞 80 µL 緩沖液中重懸細胞。

7)每 10    ^{7 個}總細胞 添加 20 µL 抗 PE 磁珠。

^{8) 充分混合并在 2?8 o} C下孵育 15 分鐘。

^{9) 每10 7 個}細胞加入1~2 mL緩沖液洗滌細胞，300×g離心10分鐘，全吸出上清。

10)在 500 µL 緩沖液中重懸最多 10 ^{7 個}細胞。注意：對于更高的細胞數(shù)量，請相應(yīng)地增加緩沖液體積。

11) 進行磁分離。

3. 檢測目的細胞的正選

1) 將色譜柱置于合適的分離器的磁場中。 

2) 用適量的緩沖液沖洗來準備柱。

3) 將細胞懸液涂在柱上。

4) 收集通過的未標記細胞，并用適量緩沖液洗滌柱。執(zhí)行洗滌步驟三次。          

5) 從分離器中取出柱并將其放置在合適的收集管上。

6) 將適量的緩沖液移至柱上并釋放靶細胞以進行進一步的流式細胞分析。

Celltechgen 實驗室是一家先進的醫(yī)學(xué)檢測實驗室服務(wù)，提供用于疾病和健康狀況的診斷、篩查或評估的全套檢測。產(chǎn)品覆蓋生化產(chǎn)品、蛋白質(zhì)、抗體、肽、小分子、標記探針染料和試劑盒產(chǎn)品組合，為生命科學(xué)研究人員提供了用于生物標志物目標識別/驗證、大容量篩選分析、基因表達分析、核酸檢測、蛋白質(zhì)生物化學(xué)和檢測的工具，以及細胞和免疫學(xué)分析。