Q: 應(yīng)該如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損? A:  建議 血清應(yīng)保存在-10℃及以下。若一次無法用完一瓶，無菌分裝血 清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。解凍時，建議將血清從冷 凍室先移至2-8℃冰箱解凍，再放置于室溫進(jìn)行解凍。請注 意，解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。嚴(yán)禁將FBS 在37℃長時間孵 育解凍。

Q: 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎? A: 一旦 您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在2周內(nèi)使用它。

Q:  如果我的FBS到達(dá)時已經(jīng)部分解凍，還能使用嗎? A:  所有的 依科賽生物ExCell Bio血清都在冰凍狀態(tài)下由干冰運(yùn)輸，因此您  收到時應(yīng)該仍是冰凍狀態(tài)。如果只是部分解凍， FBS仍然可以使 用，但是建議先將FBS在冰箱中充分解凍，之后溫和的搖晃搖勻，

再移至-10℃及以下進(jìn)行儲存。

Q: 不同批次血清顏色為什么有差異? A:  血清中含有微量的血 紅蛋白，與采集血液過程中血細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān)，只要血紅蛋 白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān)，不影

響細(xì)胞培養(yǎng)。中國藥典規(guī)定血紅蛋白含量≤200mg/L。

Q:  熱滅活是必須的嗎?A:  實驗顯示，熱滅活對大多數(shù)的細(xì)胞 而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促 進(jìn)，或全沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的 質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱滅活的血清，會增 加沉淀產(chǎn)生的概率，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小 黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中 局部溫度過高，搖晃不均勻，滅活時間過長，都會造成血清品質(zhì) 下降。若非必須，可以不需要做熱滅活這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量!

 Q: 血清使用前是否有必要熱滅活，如何熱滅活? A:  請先確認(rèn) 細(xì)胞培養(yǎng)實驗方案是否需要對血清進(jìn)行熱滅活。 一般不建議熱滅 活，熱滅活處理會損失血清中部分營養(yǎng)成分，并且容易發(fā)生蛋白 質(zhì)聚集沉淀；少數(shù)對補(bǔ)體敏感的實驗需要(如某些免疫學(xué)實驗，

腺病毒包裝，某些PS培養(yǎng)等),可酌情使用熱滅活血清。熱滅活方法：血清全解凍充分搖勻后置于56°水浴中30分鐘

Q:  細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理? A:  一旦您在細(xì) 胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否 渾濁，然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如 果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變 渾濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，

黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：①細(xì)胞生長過老，破碎的 細(xì)胞殘??；②配制培養(yǎng)基的pH 值偏高，不宜細(xì)胞生長；③培養(yǎng) 原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除；④血清等級不足以維持細(xì)胞良好的生長。

Q:FBS 中含有的絮狀物是什么東西? A:FBS  中的絮狀物可能由 很多種原因造成，其中最常見的沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋 白，不會影響血清品質(zhì)，沉淀若需去除，視沉淀大小500-1000×g,離心5-10min去除，也可不做處理。

Q: 為什么要使用正規(guī)進(jìn)口的血清? A:① 有的血清缺乏檢驗檢 疫監(jiān)管，冷鏈運(yùn)輸無法保障，嚴(yán)重影響血清批內(nèi)和批間穩(wěn)定性， 實驗數(shù)據(jù)結(jié)果不可控；②正規(guī)的血清來源于中華人民共和國海關(guān) 總署允許進(jìn)口的非疫區(qū)國家，防止未經(jīng)檢疫的血液制品中可能攜帶傳染性物質(zhì)， 一旦流入境內(nèi)，可能會對試者和研究人員的生命健康造成威脅。